Human Heparin Cofactor II
肝素輔因子II對(duì)凝血酶的抑制作用
凝血酶（IIa），肝素（HEP）和肝素輔因子II（HCII）通過(guò)隨機(jī)順序的雙反應(yīng)機(jī)制相互作用形成三元復(fù)合物。肝素隨后從復(fù)合物中解離，因?yàn)槟概c肝素輔因子II形成共價(jià)復(fù)合物。
| 尺寸 | 100微克 |
|---|---|
| 公式 | 50％（vol / vol）甘油/ H 2O |
| 分子量 |
| 存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
|---|---|
| 純度 | 通過(guò)SDS-PAGE，> 95％ |
| 復(fù)合 |
| 含量 | 凝血酶抑制 |
|---|---|
| 保質(zhì)期（正確存放） | 12個(gè)月 |
| 化學(xué)式 |
肝素輔助因子II（HCII）（肝素輔助因子A，抗凝血酶BM，硫酸皮膚素輔助因子，人leuserpin-2）是絲氨酸蛋白酶抑制劑（serpin）家族的單鏈糖蛋白（Mr = 65,600，10％碳水化合物）成員（1- 3）。肝素輔因子II的氨基酸序列分析揭示了3個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn)和2個(gè)硫酸化的酪氨酸，它們位于NH2末端（4-6）附近的7個(gè)殘基的兩個(gè)內(nèi)部重復(fù)序列中。血漿濃度估計(jì)為90 µg / ml（2）。
在凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)中，肝素輔因子II通過(guò)在存在（k2 = 4.5x10 8 M -1 min -1）和不存在（k2 = 5.0x10 5 M -1 min -1）的情況下形成雙分子復(fù)合物來(lái)抑制凝血酶。）肝素（2，7-9）。該絡(luò)合物對(duì)變性劑穩(wěn)定，并且基本上不可逆。除肝素外，多種聚陰離子化合物還可以促進(jìn)HCII對(duì)凝血酶的抑制作用（3）。這些化合物中值得注意的是硫酸皮膚素，它能加速HCII對(duì)凝血酶的抑制作用，但不能加速抗凝血酶III的作用（1,6）。該功能已被用于開(kāi)發(fā)基于血漿的肝素輔因子II特異性檢測(cè)方法。盡管HCII與其他絲氨酸蛋白酶抑制蛋白僅顯示約25％的序列同源性，但抑制凝血酶釋放的活性位點(diǎn)肽（COOH末端36個(gè)氨基酸）與凝血酶從抗凝血酶III（AT III）釋放的活性位點(diǎn)肽具有53％的同源性（4,9 ）。HCII中的易斷裂鍵是Leu-Ser，這對(duì)于精氨酸特異性蛋白酶抑制劑而言是罕見(jiàn)的（4,9）。與AT III相比，HCII抑制的僅有凝血蛋白酶是凝血酶。HCII抑制的其他蛋白酶包括α-胰凝乳蛋白酶，中性粒細(xì)胞組織蛋白酶G和灰鏈霉菌蛋白酶B（3）。肝素輔因子II的主要生理作用可能仍有待發(fā)現(xiàn)。
肝素輔因子II是通過(guò)改良Griffith等人的方法（9），從新鮮的冷凍血漿中制備的。在SDS PAGE上評(píng)估純度，并根據(jù)肝素存在下對(duì)凝血酶的抑制作用來(lái)確定活性。HCII以50％（體積/體積）甘油/ H2O供應(yīng)，可在-20°C下儲(chǔ)存。
