目錄號：IQ580
£226.00
目標(biāo)抗原
Desmoglein 2
主要說明
小鼠抗橋粒芯糖蛋白2 [7H9]
目錄編號
IQ580
數(shù)量
0.1毫升
濃度
1mg / ml的
克隆
7H9
主辦
老鼠
同型
的IgG1
免疫原
人橋粒芯糖蛋白-2的氨基酸37-164與GST融合
骨髓瘤/融合伴侶
NS1骨髓瘤
物種反應(yīng)性
人的
純化
蛋白A親和色譜
格式
純化的抗體含有PBS + 0.1％疊氮化NA
應(yīng)用
WB，ICC / IF
稀釋液
宜抗體稀釋應(yīng)通過滴定確定，但作為指導(dǎo)起點
WB 1：100 160 kDa波段（特別識別橋粒芯糖蛋白-2的前體區(qū)域）
參考
Keim，S。等。人。針對人橋粒芯糖蛋白-2前體的單克隆抗體的產(chǎn)生和表征。雜交瘤卷 27號：249-258（2008）PUBMED
數(shù)據(jù)庫鏈接
Entrez基因：1829 人類
Entrez Gene：13511 鼠標(biāo)
Omim：125671 人類
SwissProt：Q14126 人類
SwissProt：O55111 鼠標(biāo)
Unigene：412597 人類
Unigene：345891 鼠標(biāo)
也稱為
ARVC 10抗體; ARVC10抗體; ARVD 10抗體; ARVD10抗體; Cadherin家族成員5抗體; CDHF 5抗體; CDHF5抗體; CMD1BB抗體; Desmoglein 2抗體
本產(chǎn)品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。
細胞間橋粒連接的組成部分。參與斑塊蛋白和介導(dǎo)細胞 - 細胞粘附的中間絲的相互作用
免疫熒光方案 - 甲醛固定
1.從Tcunit收集細胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
2.用1x PBS洗滌并取出。
3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預(yù)熱（37℃）對甲醛中孵育12分鐘。
4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分鐘。
5.準(zhǔn)備封閉試劑，這也是抗體稀釋劑。
6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
7.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
8.準(zhǔn)備一抗（50μl/蓋玻片）和濕潤染色室。
9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風(fēng)干。
10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準(zhǔn)備二抗。
11.用1x PBS洗滌細胞5次（每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數(shù)）
12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
13.用1x PBS洗滌細胞5次。
14.登上達皮。
溶液（染色當(dāng)天新鮮制備）。
* 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
*封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
*固定液：3.5％對甲醛。
1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應(yīng)為7.4。完成體積，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。
免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定
1.從TCunit收集細胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
2.用1x PBS洗滌并取出。
3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定細胞10分鐘。
4.制備阻斷試劑，這也是抗體的稀釋劑。
5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
6.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
7.準(zhǔn)備一抗（50？l /蓋玻片）和濕染色室。
8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風(fēng)干約7分鐘。
9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時，在染色室中避光。在此期間準(zhǔn)備二抗。
10.用1x PBS洗滌細胞5次（每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數(shù)）
11。在室溫下，在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
12.用1x PBS洗滌細胞5次。
13.登上達皮。
溶液（染色當(dāng)天新鮮制備）
* 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
*封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
*固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。
Western Blotting Protocol
1.將凝膠轉(zhuǎn)移到PDVF或硝酸纖維素膜上
2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
3.在洗滌緩沖液中沖洗
4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
8.檢測（例如ECL，Amersham根據(jù)制造商的說明）
洗滌緩沖液
PBS + 0.1％Tween 20
阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5％奶粉
所用抗體的濃度取決于每種抗體，抗原的量和所用的檢測方法。通常，稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內(nèi)，但通常必須憑經(jīng)驗確定。
